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cck8详细实验步骤?
方法/步骤分步阅读
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先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。
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按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。
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接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。)
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在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃,5% CO2),向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数),将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
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用酶标仪测定在450nm处的吸光度。若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。
总结:
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1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例 ( 例如:1/2比例 ) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度。
3、建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
注意事项
如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基。
当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
生物对照实验的步骤?
所谓对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全相等的实验。对照实验设置的正确与否,关键就在于如何尽量去保证“其它条件的完全相等”。具体来说有如下四个方面:
①所有用生物材料要相同:所用生物材料的数量、质量、长度、体积、来源和生理状况等方面特点要尽量相同或至少大致相同。
②所用实验器具要相同:试管、烧杯、水槽、广口瓶等器具的大小型号要完全一样。
③所用实验试剂要相同:试剂的成分、浓度、体积要相同。尤其要注意体积上等量的问题。
④所用处理方法要相同如:保温或冷却:光照或黑暗;搅拌或振荡都要一致。有时尽管某种处理对对照实验来说,看起来似乎是毫无意义的,但最好还是要作同样的处理。
有哪些实验方法?
模型法 即将抽象的物理现象用简单易懂的具体模型表示。如用太阳系模型代表原子结构,用简单的线条代表杠杆等。
叠加法 物理学中常常把微小的、不易测量的同一物理量叠加起来,测量后求平均值的方法俗称“叠加法”。
替代法 用已知的标准量去代替未知的待测量,以保持状态和效果相同,从而推出待测量的方法叫替代法。
拓展资料:化学实验方法,是根据化学实验目的,实验者运用实验仪器、设备、装置等物质手段,在人为特定的实验条件下,变革化学实验对象的状态或性质,通过实验观察获得各种化学科学事实以探究化学问题的一种科学研究方法。

人类先祖奥德赛怎么探索未知?
人类先祖奥德赛通过多种方式探索未知。首先,他们利用观察和实验来研究自然现象,从而获得关于世界的新知识。
其次,他们通过勇敢地冒险和探索未知领域来发现新的地理和文化。
此外,他们通过科学方法和技术创新来推动科学和技术的进步,从而进一步拓展人类对未知的认识。
最后,他们通过交流和合作,共享知识和经验,不断推动人类对未知的探索。这些方法使人类先祖能够不断扩大知识的边界,不断探索未知的领域。
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